Cientistas e médicos da Alemanha e da Itália, há dois anos, conseguiram substituir 80% da pele de um menino com epidermólise bolhosa por pele transgênica de suas próprias células. A doença não voltou a aparecer. Pesquisa publicada na Nature.
Segundo nplus1.ru, a epidermólise bolhosa (EB) é uma doença genética caracterizada pela formação de bolhas e erosões na pele e nas mucosas, além da sensibilidade da pele a pequenas lesões. O BE é dividido em três tipos principais: simples, limítrofes, distróficos, que são determinados pelo nível de formação de bolhas nas camadas da pele. No tipo limítrofe, de que o paciente sofria, formam-se bolhas ao nível da lâmina lúcida.
Isso se deve à interrupção do gene LAMB3, que codifica a proteína âncora epidérmica laminina β3. Nesse caso, a conexão mecânica entre a epiderme e a derme é interrompida. Os pacientes sentem dores fortes, muitas vezes sofrem de infecções de pele e câncer.
Anteriormente, essa doença era considerada incurável. Segundo a associação internacional DEBRA International, cerca de meio milhão de pessoas estão doentes no mundo (nos Estados Unidos, uma em cada 50.000 crianças nasce com epidermólise bolhosa).
e. Paciente antes da cirurgia. b. Diagrama das áreas afetadas (verde indica áreas com bolhas, vermelho - com epiderme perdida), p. Pele reconstruída com poucas bolhas (≤2% da superfície), d. Elasticidade normal da pele. e. Sem novas bolhas no local da biópsia. Foto: Tobias Hirsch et al / Nature, 2017
Durante uma entrevista coletiva por telefone com a Nature, os autores do estudo disseram que o prognóstico do paciente com quem trabalharam era muito ruim, ele havia perdido quase toda a epiderme, sofria de distrofia e precisava constantemente de morfina. Durante o último ano antes do início do experimento, ele comia apenas por meio de uma sonda e custou muito esforço para mantê-lo vivo. Naquela época, o paciente tinha sete anos.
O transplante de pele do pai e as tentativas de usar análogos artificiais não ajudaram - a pele não criou raízes e os médicos acreditavam que o paciente praticamente não tinha chance de sobreviver. Agora, dois anos depois, ele está vivo, sentindo-se bem, praticando esportes na escola, e sem bolhas na pele.
Para criar a pele transgênica, uma biópsia da epiderme (cerca de quatro centímetros quadrados) foi retirada do paciente e culturas individuais foram cultivadas nas camadas de fibrina. Eles foram tratados com vetores retrovirais, introduzindo uma cópia do gene LAMB3 "saudável" no genoma. Ao mesmo tempo, o gene caiu em um lugar arbitrário, no entanto, a análise de PCR mostrou que na maioria das vezes ele cai nas sequências não codificantes do genoma e não interrompe o trabalho de outros genes.
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Durante o trabalho com pele transgênica, os cientistas não observaram nenhum problema associado ao uso de vetores retrovirais para modificação do genoma. Além disso, eles ressaltam que as modificações genéticas nesse tipo de cirurgia afetam apenas a pele, não havendo risco de afetar o resto do corpo.
As culturas de células epidérmicas foram cultivadas na forma de grandes lâminas, cuja espessura podia ser controlada, da mesma forma que as culturas das próprias células da pele dos pacientes em caso de queimaduras. As camadas foram então cuidadosamente colocadas sobre a derme exposta, que era completamente antibacteriana. Costura e quaisquer outras manipulações mecânicas não eram necessárias, as camadas criaram raízes por conta própria.
A estabilização primária da nova pele, disseram os cientistas, leva cerca de duas semanas. Depois disso, a pele parece e se sente quase como se fosse própria. Ele também começa a crescer gradualmente o cabelo e desenvolver glândulas sudoríparas e sebáceas. O transplante foi realizado em três etapas e, em geral, todo o tratamento durou cerca de oito meses.
Os cientistas acreditam que a pele do paciente permanecerá saudável ao longo da vida, uma vez que foram feitas modificações genéticas, inclusive nas células progenitoras (células-tronco em estágios primários de diferenciação). Essas células mantêm o tamanho de sua população em um determinado nível e, se necessário, substituem as células da epiderme (toda a epiderme é substituída aproximadamente uma vez por mês).
Substituição gradual da epiderme por diferentes tipos de células progenitoras. Foto: Tobias Hirsch et al / Nature, 2017
O rastreamento de clones celulares mostrou que as chamadas células-tronco “holoclonais” (de vida longa e praticamente indiferenciada) são as principais responsáveis pela regeneração de longo prazo da epiderme. Os cientistas enfatizaram que o paciente, que em 2006, no decorrer de uma operação semelhante, teve a pele das pernas substituída, permanece saudável há 11 anos.
No momento, os cientistas lançaram dois novos estudos clínicos paralelos, durante os quais planejam melhorar seu método e monitorar possíveis efeitos colaterais.
